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            什么是Neuromab 抗體的親和力,如何進行測定?

            2021-09-10      325
              Neuromab 抗體是由B細胞分泌的一類蛋白質,針對某種病原有免疫能力,故稱之為抗體。而抗體親和力是指抗體分子與抗原表位之間結合的強度,術語名稱通常是解離常數KD。通常,抗原抗體分子之間親和力包括離子鍵、氫鍵、疏水作用及范德華力等。
              
              抗原抗體的結合反應是一個可逆的反應,既有正相反應過程,即抗原和抗體結合反應生成抗原-抗體復合物的正反應過程,也有逆向反應,抗原-抗體復合物解離反應生成抗原、抗體的逆反應過程。
              
              目前,Neuromab 抗體親和力測定方法根據檢測原理分為熱力學檢測方法:等溫滴定量熱法、動力學檢測方法動態平衡檢測方法。下面,創亞化工小編將為大家分析等溫滴定量熱法和動態平衡測定法的基本原理。
              
              一、等溫滴定量熱法:
              
              等溫滴定量熱測定生物分子反應熱,同時確定結合/解離平衡常數、反應化學量(n)、焓(ΔH)和熵(ΔS)。微量熱儀中有兩個池,參比池(水)和樣品池。參比池和樣品池被設定到所需的實驗溫度。將裝有配體分子的滴定針插入包含目標蛋白的樣品池中并逐漸滴定注入。
              
              當有配體與蛋白質結合,則可檢測到被吸收或是被釋放的熱量變化。每一次滴定時,量熱儀測量被釋放或吸收的所有熱量,直到結合反應達到平衡。測得的熱量與結合量成正比。
              
              二、動態平衡測定法
              
              基于該原理的常用方法有ELISA,Cell-BasedELISA、流式細胞術(FACS)、均相時間分辨熒光(HTRF),在一定抗原存在情況下,將待測抗體進行梯度稀釋,檢測抗原-抗體復合物的濃度,當抗原-抗體復合物濃度站總抗原濃度一半時,此時,Neuromab 抗體的濃度值(EC50)即為KD值。
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